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组织与细胞化学技术(histochemistry and cytochemistry technique)

组织与细胞化学技术(histochemistry and cytochemistry technique)是研究组织与细胞显微结构和超微结构的化学组成及其定位的科学。主要研究对象是生物大分子(如核酸、蛋白质、酶、多糖和脂类等)在细胞内的结构和功能活动中的分布与变化以及亚细胞组分和细胞器在整个生命活动中的作用等。

细胞化学方法能够对细胞内的各种成分进行定性、定位、定量研究,包括悬浮胸腹水细胞、血液细胞以及体外培养细胞均能产生同样良好的效果。目前,用细胞化学技术所能显示的化学成分有蛋白质(显示某些特定蛋白、某些氨基酸或功能基)、核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)、糖类(如糖原、粘多糖和糖脂等)、脂类(如中性脂肪、磷脂和固醇等)、酶(包括水解酶如磷酸酶)、特异抗原(其化学本质可能是多肽、蛋白、糖蛋白等)、无机盐和微量元素(如铁、铜、锌、钻、镁等)。

细胞化学染色的原理是细胞中的化学成分和其相应的底物呈一系列的化学反应,形成于显微镜下可见到的反应产物。常见有:

1.孚尔根反应法(feulgen reaction)显示DNA呈现紫红色。

2.甲绿-派郎宁法(methyl Green-Pyronin method)显示核酸(甲绿染DNA呈现绿色,派郎宁染RNA呈现红色)

3.苏丹Ⅲ冰冻切片染色显示中性脂肪呈现橘红色。

4.普鲁士蓝反应显示组织中含铁血黄素。

5. 嗜银染色,显示弹力纤维、基底膜及尼氏小体和神经纤维等(左图)。

6.过碘酸雪夫反应(periodic acid schiffreaction, PAS)显示糖原和其它多糖物质为紫红色(右图)。

嗜银染色、PAS染色
左图:嗜银染色,大鼠脑神经细胞及突起阳性;右图:胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性

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