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常用的组织固定液

1.单纯固定液

(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。

甲醛(40%) 100 ml

无水磷酸氢二钠 6.5 g

磷酸二氢钠 4.0g

蒸馏水 900 ml

(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。

(3)4%的多聚甲醛:主要用于培养细胞的固定。

2.混合固定液

(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。

甲醛(40%) 100 ml

95%乙醇 900 ml

(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液:多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。

无水醋酸钠 1.25 g

升汞 6.0 g

蒸馏水 90 ml

使用前加入甲醛10 ml

(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。

饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml

甲醛 25 ml

冰醋酸 5 ml

(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。

无水乙醇 60 ml

氯仿 30 ml

冰醋酸 10 ml

(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。

升汞 5.0 g

重铬酸钾 2.5 g

硫酸钠 1.0g

蒸馏水(加至) 100 ml


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