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巴氏染色法

染色的目的是使细胞结构清晰,细胞透明度高,便于观察。染色归纳起来有两大类,即常规染色方法和特殊细胞化学染色方法。常用的染色方法有: 苏木精伊红染色法(同组织切片染色)、巴氏染色法、绍氏染色法迈格吉染色等。

巴氏染色法

1.染液配制

(1)Harris苏木精的配制:(同组织染色)

(2)橙黄-G6:取橙黄-G6 O.5g,溶于95%酒精100ml中,加磷钨酸15mg。

(3)EA36染液:

先配制原液(贮备液):

①亮绿液:亮绿0.5g,溶于5ml蒸馏水中,再加纯酒精至100ml。

②俾士麦棕液:俾士麦棕0.5g,溶于5ml蒸馏水中,再加纯酒精至100ml。

③伊红Y液:伊红Y 0.5g,溶于5ml蒸馏水中,再加纯酒精至100ml。

临用前,将上述亮绿液45ml,伊红Y液45ml,俾士麦棕液10ml混合后,再加人磷钨酸0.2g,饱和碳酸锂水溶液1滴。

也可配制EA50液:

3%亮绿水溶液10ml 纯甲醇250ml

20%伊红Y水溶液20ml;冰醋酸20ml

磷钨酸2g(水溶后加入)95%酒精700ml

2.染色步骤

3.结果 巴氏染色法将胞核染为深蓝色;鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色,表层不全角化细胞胞质染粉红色,完全角化细胞胞质呈桔黄*色;高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄*色;腺癌胞质呈灰蓝色;中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色;红细胞染粉红色,粘液染成淡蓝色或粉红色。

4.巴氏染色特点 细胞透明度好,结构清晰,涂片色彩丰富而鲜艳,由于能显示鳞状上皮不同角化程度,常用于阴道涂片测定雌激素水平。宫颈涂片和痰涂片中分化差的鳞癌小角化细胞显示桔黄*色,在红色坏死背景中特别突出,不易漏诊。


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