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常见细胞学取材

1.痰液脱落细胞的取材

(1)痰液采集:通常采用自然咳痰法。嘱病人早晨咳痰之前,应漱口、刷牙,以避免食物残渣和细菌的污染。指导病人深呼吸后用力咳痰,咳出肺深部的痰液吐人痰盒内送检,立即制片、固定。常规送痰3次,每天1次。但是晨痰也有一定的缺点,晨痰内的细胞往往发生不同程度的退变,还常常混有上呼吸道的分泌物,使诊断的准确率降低,因此有人主张最好早晨排痰以后,留取上午8~9点钟的新鲜痰送检较好。也可采用Saccmanno方法,让受检者把痰咳人1.2cm×3.5cm的塑料试管内,试管内装入50ml固定液。固定液组成:50%酒精48ml,50%聚乙二醇lml和lml的利福平。方法:摇动试管使痰液与固定液混合,然后将混合液放入离心管内,用搅拌机进行34秒钟的高速搅拌混合,直至达到浑浊、均匀一致状态。再以1500r/min离心15分钟,取沉淀物涂片。该法制备的涂片细胞成分多,细胞散在。

随着纤维支气管镜的广泛应用,在直视下于病变部位处直接刷片,不但可以做出病变性质的诊断,而且可以定位。但是从刷片将细胞转到玻片上以后,必须迅速固定,防止涂片干燥而影响诊断。

(2)痰液类型及取材:痰液是从各支气管所汇集韵分泌物,其中包括从病变处来源的痰液。病变处的痰液有特有的性状,应仔细挑选。若痰内混有大量的食物残渣或唾液和液化的标本,应弃掉,再送检。从肺部来源的痰一般比较粘稠,或有粘液丝。痰的性状可分五种类型:

粘液痰:多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠,用镊子牵拉时,往往可拉成很长的细丝。如果其中有乳白色的颗粒状物,往往提示有肺癌的可能,必须取这部分痰液做涂片检查。

粘液脓性痰:是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑选粘液丝的部分做细胞学检查,以提高癌细胞检查的阳性率。

脓性痰:为黄*色或黄绿色的粘痰,因细菌种类的不同,痰的粘稠度和颜色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检,以取得较好的结果。

泡沫痰:即痰呈泡沫状,此种痰应在除去泡沫后,采取其中的粘液丝做涂片检查。

血丝痰:即痰内带有少量的血液,这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核,有时也见于支气管炎。为了明确出血的原因,应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂片,进行检查。

(3)注意事项:①痰标本应尽快涂片,在室温下,可以保存2~4小时,在冰箱内可保存两天;痰液量一般以2ml-3ml(2-3口痰)为宜;②采痰时应采用内面涂蜡的痰盒,可防止痰液被吸收而难于挑痰制片;③采集痰标本没有禁忌证,但如果病人在行支气管镜检查之后,立即进行痰细胞学检查,往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞,而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查5~10天后再行痰细胞学检查。

2.胸、腹水脱落细胞的取材

(1)胸腹水脱落细胞采集:送检胸腹水100ml/例,观察其性状和颜色做好记录。倒掉上清液,取出20ml分置两个试管中,用离心机以3000r/min离心10-15分钟。将沉淀物吸至玻片上,用吸管与玻片平行方向轻轻擦涂,使沉淀物在玻片上均匀分布、厚度适宜、凉之稍干固定、染色。制片4-6张。

(2)注意事项:①离心后吸弃上清液,取沉淀物上面呈灰白色、厚薄不同的细胞层制片;如看不见细胞层,轻轻吸弃上清液,仔细选取沉淀物最表面物制片;②沉淀物极少,血与细胞成分混合,呈粉红色,吸弃上清液后取所有沉淀物制片。

3.女性生殖道脱落细胞取材

(1)女性生殖道脱落细胞的采集:宫颈外口刮片是诊断宫颈癌的重要标本来源。先以棉棒拭净宫颈口的分泌物,然后利用小脚刮板在宫颈外口(鳞、柱状上皮交界处)轻轻刮一圈,涂片固定。也可以在糜烂等可疑病变部位直接涂片。此法应用广泛,多用于宫颈癌检查。

后穹隆吸片是利用带橡皮球的吸管在后穹隆吸取,将吸取物喷在玻璃片上,向一个方向轻轻涂抹,及时固定。

检查内分泌水平,取材最佳部位为阴道侧壁的上1/3处涂片,其次是阴道后穹隆部位;未婚女性可在小阴*唇内侧壁取材。

(2)注意事项:①细胞涂片前24小时内不能同房、盆浴、阴道冲洗和用药。器械要干净清洁;②颈管刮片之前,必须严格消毒,以防止感染;③阴道细胞取材时勿碰及子宫颈,近期无论局部或全身均不能应用对阴道上皮有影响的药物,炎症表现明显时,不能评价激素水平,一般常用巴氏染色,亦可用邵氏染色。

4.尿液脱落细胞取材

(1)尿液脱落细胞采集方法:多采用晨起自然尿,留尿至少50ml,要保证尿液新鲜,并有足量的细胞,可叩击病变部位或活动体位,促使瘤细胞脱落。女性病人应避免阴道分泌物的污染,最好导尿,或者留取中段或后段尿送检。

(2)注意事项:①送检尿液标本最好连续3次,收集的标本应尽快送检,否则应冷藏(可保留48小时)或加人防腐剂,即按l:10的比例加入10%福尔马林或95%酒精作为防腐剂;②尿液中蛋白含量较少,沉淀物不易粘附于玻片上,可先在玻片上涂上甘油血清或甘油蛋白;③尿中含有大量盐类物质,男性尿中还有一种胶冻物,影响镜检。可先0.5mol/L NaOH或0.5mol/L HCl调节pH值为6.0,可除去普通盐类结晶;向沉淀物内加5ml-10ml 95%酒精,静置5分钟,然后加蒸馏水轻摇可溶解胶冻物,再离心、制片。

5.食管脱落细胞、胃液取材

(1)食管脱落细胞采集方法:即食管拉网法

一般采用塑料树胶双腔管采集器,由主管和二分管组成,主管长约65cm、横径0.3cm,每5cm有一刻度。双腔管近端接二分管,一腔通入气囊用于充气,另一腔通主管末端开口用以抽吸表面细胞,通气管端接注射器。气囊套以细棉线或线网作为擦取表面细胞之用。

拉网检查时,受检者晨起禁食、水,禁吸烟,禁钡透(需透视定位者,应隔24小时后进行拉网检查)。检查前用空针管充气检查气囊是否漏气,并确定容气量。吞网时受检者连续吞咽,检查者将网囊徐徐送下,到达贲门后充气,上下拉动以采取上皮细胞,同是左手持针管控制压力,右手持拉网管缓缓上移,到距门齿20cm处,放气取出网囊直接涂片,立即固定。

食管拉网检查前,应首先了解病史,拉网前须取下受检者的活动假牙。拉网时若发现病人剧咳憋气,应立即终止拉网检查。拉网检查后嘱患者进温水饮食。急性上呼吸道感染者,最好康复后再拉网检查;近期有上消化道活动性出血、肝硬化、食管静脉曲张者,绝对禁止拉网;对严重心脏病和高血压病人、哮喘及肺功能差的患者、以及晚期肿瘤有穿孔危险者,一般不做拉网检查。

(2)胃液脱落细胞采集方法:基本上有三种。一是冲洗法,有人工加压冲洗和电动洗胃机冲洗法等,将采集的胃液进行离心,取沉淀物涂片、固定。二是摩擦法,包括网套气囊法(与食管拉网取材相似)、海绵摩擦法和胃刷摩擦法等,取材后直接涂片固定。三是胃镜直视下细胞收集法,包括直视下刷拭、冲洗和吸引法,这种方法取材部位准确,阳性检出率高。胃癌普查时常采用冲洗法。
检查时,先让病人饮下含蛋白酶10mg的温开水300ml-400ml或生理盐水后,经口腔置入胃管达60cm左右,病人采取平卧或左侧卧位,用100ml(或50 m1)注射器,反复加压冲洗,同时轻轻按摩上腹部或转动体位,将胃内液体及胃内容物全部抽出弃掉,此为第一液。随后向胃内注入生理盐水或林格液300ml-400ml,再用力反复抽注,并让病人转动体位或按摩腹部,使胃腔各部分得到充分冲洗,然后将胃内冲洗液抽出,此为第二液;最后用pH值5.6醋酸缓冲液300ml-400ml注入胃内,以同样的方法进行冲洗后,抽出胃内冲洗液为第三液,抽出的第二、第三液立即冷却,以3000r/min离心5分钟,弃去上清液,取沉淀物涂片,稍干立即固定。电动洗胃机冲洗法是用空气压缩机(或气泵)代替人工加压操作,其特点:操作简便、省时,冲洗压力保持恒定、冲洗液喷射充分均匀,阳性检出率高,因此临床应用更为广泛。

进行胃冲洗时,应注意检查前要准备充分,胃内无食物残留;冲洗时,保持压力适当、恒定;病人的体位一般采取左侧卧位冲洗,应根据病变部位调整放置胃管的位置、深度;从胃冲洗到涂片固定一般不超过10分钟。冲洗液应新鲜配制,温度应适宜,操作宜迅速准确,防止脱落细胞发生人为性的变化或破坏。如抽出的胃冲洗液内有多量新鲜血时,要及时调整压力,改变胃管的深度和位置,并变换体位。

6.淋巴结及肿块穿刺取材

(1)取材方法:一般采用20ml~50ml注射器、7-9号针头。患者取坐位或卧位,充分暴露待检淋巴结及肿块。常规碘酒、酒精局部消毒,一般不用局麻。穿刺者以左手拇指及食指固定淋巴结及其邻近皮肤,右手持针与体表呈45°角斜刺进针,然后在左手帮助下,将针芯后拉,保持空针管内一定的负压,针头不必从淋巴结内拔出,在不同方向抽吸几次后拔针。迅速将空针管内的吸出物喷注到玻片上;进行涂片、固定。

(2)注意事项:①查清淋巴结及肿块所在部位,避开体表及肿块周围的血管;②与其他部位穿刺一样,整个过程一直保持针管负压,当抽吸完成时,在针头未拔出淋巴结之前,可先将针筒从针头上取下,消除负压状态,然后出针,以免出针时将吸取细胞吸入针筒内,难以推出涂片。


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