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豚鼠的取血法及血清和血浆的制备方法

一、豚鼠的取血法

(1)足背中静脉取血:助手固定动物,将其后肢膝关节伸直捉到实验者面前,实验者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中足静脉后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器针刺入静脉。拔针后立即出血,呈半球状的隆起。采血后,用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时,两后肢交替使用。

(2)心脏取血:豚鼠的心脏取血法与兔的采血方法相似。

二、血清和血浆的制备方法

血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:

(1)血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡后离心(一般为3000rpm,离心 5~10min),得到的上清液即为血清,可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分),分装备用。

(2)血浆制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液 = 1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。初用者最好将上清移至另一清洁容器,吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸,切忌不能吸起细胞成分。

(3)富含血小板血浆制备:将获得的血液经800rpm,离心5min,其上清即为富含血小板血浆。

常用血液抗凝剂
剂名

抗凝力

机理

应用

禁忌

10%草酸钾 0.2ml抗凝10ml 的血 与Ca2+结合成不溶性草酸钙而抗凝血 非蛋白氮二氧化碳结合力 血K+
血Ca2+
草酸钠 1~2mg抗凝1ml的血 与Ca2+结合成不溶性草酸钙而抗凝血 凝血酶原时间及复钙时间测定 血K+
Ca2+
3.8%枸橼酸钠 6mg抗凝1 ml的血 与血中生成不溶性离子化的枸橼酸钙,阻止血液凝固 输血、凝血象1:9血沉1:4  
双草酸盐(草酸钾、草酸胺) 0.5ml抗凝5ml的血 保持红细胞形态不变 RBC压积测定  
草酸钾3g、氟化钠1g混合剂 4mg抗凝1ml的血 抑制葡萄糖分解而保持血糖浓度 血糖测定 BUN
(尿素氮)
肝素 0.1ml抗凝5~10ml的血;15±2.5IU(干粉)抗凝1ml血 抑制凝血酶原转为凝血酶 血氨
血气分析
3P试验
EDTA-K2 1.5~2.2mg(干粉)抗凝1ml血 与Ca2+结合成不易电离的可溶性络合物 血细胞计数 凝血象,血小板功能

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