高钾血症的造病和检测

【实验目的】

1．观察高钾血症对机体的影响，特别是对心脏的毒性作用。

2．了解高钾血症的抢救措施。

3．掌握高钾血症时心电图改变的特征。

【实验原理】

血钾浓度升高可对心肌细胞产生毒性作用，干扰正常心肌细胞的电生理活动，引发多种心律失常，尤其是心室纤颤和心跳骤停。本实验通过静脉输入氯化钾，造成家兔高钾血症，诱发心律失常，然后再给予葡萄糖酸钙进行抢救。

【实验动物】

家兔，体重 1.5～2.0 kg。

【药品与器材】

25％乌拉坦溶液，4％氯化钾溶液，10％葡萄糖酸钙溶液，生理盐水。

兔手术台，电子称，手术器械一套，20ml、10ml、5ml注射器，5ml刻度吸管，洗耳球，50ml微量移液器，l.5ml塑料管，头皮针，输液装置一套，动脉插管1根，气管插管1支，火焰光度计一台，心电针型电极。

【实验步骤】

1．称重、麻*醉和固定动物 家兔称重后，用25％乌拉坦溶液（5ml/kg）从耳缘静脉缓慢注入。家兔自然倒下，牵拉后肢无阻力时，表示麻*醉药量已足，仰卧位固定。

2．颈总动脉插管? 家兔仰卧固定于兔手术台，颈前部去毛。在甲状软骨水平向下作颈部正中切口，长约4cm。逐层钝性分离颈部组织，暴露出家兔一侧颈总动脉，并在其下穿两根细结扎线，远心端接扎，近心端放置动脉夹阻断血流。在动脉夹的近头侧约0.8～1.0cm于血管下方留置一结扎线，备固定插管用。在颈总动脉远心端结扎部位作斜“V”形剪开，勿剪断动脉，插入动脉插管，用预先置的丝线固定动脉插管。

3．采集血样测定血钾

（1）火焰光度法：松开动脉夹，弃去最先流出的几滴血，然后用小试管接取血液0.5～1.0ml，静置待凝固（天冷可置于37℃水浴或温箱中促其凝固），15～20min后离心（3000rpm，15min）分离血清备测定血清钾浓度之用。取血后应立即用生理盐水少许冲洗动脉插管，以免塑料管内血液凝固，影响下一次取血。

（2）血气分析法：松开动脉夹，缓慢打开三通开关，弃去最先流出的2、3滴血液后，然后立即将插管口直接对准电极板芯片的注血口，注入全血到标准刻度，盖上小盖，插入i-STAT血气分析仪，进行血气分析。测定血液的pH、K⁺、Na⁺、Cl^-、PaO₂、PaCO₂、BE、SB等。

注意：冲洗动脉插管的方法：用5ml注射器吸取2～3ml生理盐水，配置正好与导管塑料管内径大小一致粗细的注射针头，把注射针头插入导管塑料管，两者紧密配合。然后推动注射器柄，同时稍稍松开动脉夹，可见塑料管内血液被推回血管内。当塑料管内为生理盐水时立即关闭动脉夹，同时停止推液，并使注射针与塑料管分离。

6．连接心电图各导联电极 导线连接的方法为：在动物四肢远端的踝部皮下分别用心电针型电极分别插入，进针约2cm，不能刺入肌肉。导联线按右前肢（红），左前肢（黄），左后肢（绿），右后肢（黑）的顺序连接，电极另一端连接心电图机。

7．开启心电图机，选择Ⅱ导联（或aVF）导联描记10～15个正常心电波形（针型电极刺入部位要对称，导线避免纵横交错，实验台上液体要及时排除）。实验中，如果发现心电图描记有干扰或其它异常情况，应及时检查接地和各导联线的连接情况。

以描记的心电图计算心率：在一定走纸速度时，计算若干小格有多少心电波形，即可计算出心率。

观察心电波形：区分P、QRS主波波群以及T波。T波直立，若正常时T波高于0.15mv，可以试着调节至其它导联，选用便于观察者。

标记：正常或然后实验中观察的各种心电变化图形，必须在描记的心电图纸上及时写明“正常，描记时间”、“注射4%KCl，用量，时间”等实验条件。

8．滴注氯化钾溶液 用小儿头皮针插入耳缘静脉（从远心端开始使用备穿刺注射的静脉），并用木夹固定，经耳缘静脉缓慢推注4%KCl，每分钟1.5ml。同时，在另一侧耳缘静脉准备推注葡萄糖酸钙溶液的通路。推注氯化钾时，每3min描记一次心电图，观察无明显改变，以及呼吸和血压的变化。当出现P波低平增宽、QRS波群压低变宽和高尖T波后，停止推注氯化钾溶液。按步骤5的方法采集血液标本，选择测定血钾方法。在出现心电图形明显变化时，应同时计算心率，与正常时作比较。

9．严重心律失常及其抢救 停止推注和采集血液标本后，继续缓慢推注4% KCl，间断观察，每2～3min记录一次心电图。观察有无明显改变，以及呼吸和血压的变化。当出现P波低平增宽，QRS波群低平变宽，T波高尖，出现室颤或室扑时，立即停止推注氯化钾溶液，改为10％葡萄糖酸钙溶液推注。如抢救成功则恢复窦性心律。再次按步骤5的方法采集血液标本。

10．致死作用观察 打开家兔胸腔，看到心脏搏动后，迅速静脉推注4％氯化钾溶液（约10 ml/kg），观察心博变化直至停搏。可用注射器从心脏抽血，如血液不凝固，则直接离心取上清测K^＋。

11．制备血清 如进行火焰光度法测定血清钾，将第一、第二和第三次收集的血液分别作好标记，与配对的离心管（血标本管或盛水的离心管）平衡后，以3000rpm，5～10min离心。小心取血清置干燥的干净小试管（加标记），成为待测血清样品（溶血样品不能用来测定血钾）。测血钾时，取双份血清样品各20ul，各加蒸馏水稀释到2ml（稀释约100倍），充分混匀。测定双份样品的血清钾离子浓度，在偏差不大的情况下，可用平均值表示测定结果。

【注意事项】

1．严格控制推注KCl溶液的浓度、速度，必须缓慢、匀速推注。

2．在推注KCl溶液时，如发现动物突然挣扎或呼吸急促，要立即停止注射，并及时取血，备测定血钾之用。

3．每次取血后，须用生理盐水冲洗导管，下次取血时应丢弃前段生理盐水和几滴血液。

4．取血及分离血清时必须严防溶血。取血清稀释时，加样量要准确。

5．观察EKG时，不能无限制使用心电图纸。明显浪费心电图纸，是不良学习风气的一种表现。

6．观察EKG时若出现干扰，在排除肌电干扰和机器本身干扰后，应检查各导线有无脱落，电极与皮肤是否接触紧密，并尽量避免导线纵横交错现象，兔台要保持干燥。

7．若采用血气分析测定血钾只做实验步骤5、8二次检测；若采用火焰光度法测定血钾可做实验步骤5、8、9、10的血样检测。血钾浓度测定由实验室技术人员作具体带教。

【思考题】

1．推注氯化钾时，你观察到哪些心电图的变化，发生机制是什么？

2．待动物出现高血钾症后，可设计哪些抢救治疗方案？葡萄糖酸钙抢救高血钾症的理论根据是什么？

【实验结果记录】