一、脂类概述
脂类物质在人体中占有相当大的部分，通常它们在人体内以两种形式存在，第一种为脂肪，主要为中性脂肪，储存的部位如皮下，大网膜，肌间肾周围组织等部位，另外一种为结构脂肪，如磷脂，胆固醇等它们与蛋白，糖类结合在一起存在于细胞内，构成细胞的组成成分。
1、单纯脂质：由脂肪酸各醇化合的酯，如中性脂肪，油及蜡等，苏丹染料可染为黑色或红色。
2、复合物质，脂肪酸的酯经水解后生成醇类，脂肪酸，磷酸和含氮的碱基等，复合脂质分为磷脂和糖脂。
①磷脂：卵磷脂，脑磷脂和神经鞘磷脂。苏丹黑染色为阳性，PAS反应为阴性。
②糖脂，PAS反应呈阳性。
③衍生脂质：指尚具有脂质性质的单纯脂质或复合脂的水产物，属于这类的有脂肪酸和固醇类。
脂肪酸：硫酸耐尔蓝阳性，PAS阴性。
胆固醇及其酯：Schultz试验阳性。
组织化学的脂类物质：
1、中性物质，如甘油三酯，胆固醇及其酯，类固醇和某些糖酯。
2、酸性脂质，脂肪酸，磷脂。
二、苏丹III IV联合法（combined SudanIII IV method for lipids）
1、脂类组织的固定及固定液
脂类组织的固定特别要注意的问题，就是不要选择含酒精的固定液，因为酒精可把脂类物质溶解，因此，用于脂类物质的首选固定液是甲醛，它可较好地保存脂类物质。
2、试剂的配制：苏丹III0.2g，70%酒精50ml；苏丹IV0.5g丙酮50ml。
3、操作步骤：
结果：脂类物质呈现橘红色或鲜红，核蓝色。
4、注意事项：
（1）苏丹III IV是一种偶氮类染料，不溶于水，配制时只能用酒精或丙酮当溶剂。
（2）进入染液前，切片要经过酒精洗，但酒精浓度不能太高，这样染液可以减少沉淀。
（3）最好使用漂浮染色法。这样可充分显示脂类物质。
三、显示脂类的油红法：
（1）操作步骤：
结果：脂类物质显示红色，细胞核显示蓝色。
（II）试剂的配制：
油红o（oil red o） 0.5g
异丙醇（isopropanot） 100ml
将异丙醇放入三角烧瓶，再加入油红O，于水浴中慢慢加热使之溶解，待至完全溶解后取出，冷却至室温后，过滤，装于棕色小磨沙口瓶保存，临用前取6ml加蒸馏水4ml，混合后静置10min后过滤，染色时间5-15min。
四、苏丹黑B显示脂类物质
（I）、操作方法：
结果：脂类物质：黑色，细胞核：红色。
（2）试剂的配制：
苏丹黑B（sudan blank B）0.5g
70%酒精 100ml
取一三角烧杯，装入酒精，再加入苏丹黑，在水浴中边加热边搅拌，直至沸腾达2-3min，取出待冷却后过滤，溶液保存于小磨沙瓶中。
五、漂浮染色法显示脂类物质：
（I）操作方法：
结果：依据选用的方法显示出各自的结果。
（III）注意事项：
六、Schultz法显示胆固醇与胆固醇酯
（I）操作方法：
结果：胆固醇和胆固醇酯呈绿色反应，当反应时间延长至30min时，反应物则转变为棕褐色。
（I）试剂的配制：
取一容器，盛入冰块或冰水，将冰醋酸装于小瓶后置入冰块中，再加入硫酸，混合后静置数分钟后取出即可。
（II）注意事项：
1、胆固醇和胆固醇酯显示好坏， 取决于切片氧化的程度，本法用的2.5%的铁明矾氧化2天或更长，如果在2天里的氧化效果不好，则可再延长氧化的时间。
2、皮尔斯主张2.5%的铁明矾用0.2M醋酸盐缓冲液来配制，且于 37℃处理7天。
3、配制醋酸和硫酸混合液，纯度要求较高，应用分析纯以上，如纯度较低，杂质含量较高，混合好可产生大量的气泡，影响观察。
临床应用：
1、鉴别脂滴和糖元。在HE切片中，如在胞浆内有大小不等的空泡出现，这主要有可能发生的是：脂滴被溶解，或糖元在常规处理时丧失掉了。用脂肪染色可以给予证明。
2、观察肝细胞，心，肾，骨骼肌细胞糖元的分布。如急性心缺血，心肌细胞由于缺氧面消耗了糖元。
3、鉴别横纹肌瘤和颗粒细胞母细胞瘤，前者阳性，后者阴性；而泡末细胞瘤和卵巢纤维瘤的区别，前者为阳性，后者为阴性。
4、与黏液物的区别。
5、Fabry病的诊断：Fabry病是一种α-连锁先天性糖鞘脂代谢障碍，细胞浆物质PAS和苏丹黑染色呈强阳性反应。
甘油明胶配法：
甘油50ml，蒸馏水50ml，明胶10g，酚0.5ml。把明胶溶于蒸馏水，搅拌片刻，放入37℃的温箱中过夜。第二天再加入甘油，加入酚做防腐，然后存放于4℃冰箱中，用时取出，用热水促其溶解即可使用。