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色素分类及黑色素染色

一、色素分类

在常规的病检中,经常可见到某些组织中出现有色物质,这些物质不管是机体自身产生的也好,还是从体外进入组织的,都统称为色素。

最常见的是在人体皮肤的基底细胞层。在HE染色后,可见到棕黄*色的颗粒,此称为黑色素,在肺部被肺泡吞噬细胞后所见到的则为含铁血黄素,而在老年人的心肌细胞内所见的棕黄*色颗粒称之为脂褐素,由于色素的来源不同,故有不同的名称,通常把它们分为几种类型:

(一)、内源性色素

这一类色素由机体自己产生的色素,这些包括黑色素,含铁血黄素,脂褐素,胆红素,疟色素,血吸虫色素,寄生虫性色素和橙色血质等等。

1、血缘性色素,如血红蛋白,含铁血黄素,橙色血质,胆红素,疟色素、血吸虫色素。

①血红蛋白,正常时血红蛋白仅见于红细胞内,当出现溶血性疾病时,肾曲管可出现血红蛋白管型。血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成,其中的二价铁紧密地结合在亚铁血红素的卟啉环中,一般的铁反应呈阴性。可用联苯胺法和白专利蓝法来给予证实。

②含铁血黄素,正常的情况下,在骨髓,肝和脾等处可见到少量的,由于它是一种血源性血红蛋白素,颗粒大小不一,形态不等,呈金黄*色,故称为含铁血黄素。最常见于吞噬细胞内,细胞崩解后亦可见于细胞外。如心衰细胞,由于长期的肺淤血和出血,可在肺泡内见含有大量含铁血黄素的心衰细胞,这些铁蛋白分子含高铁盐,用Perls法,Schmeltaer可将其显示出来。

③橙色血质,其化学结构与胆红素相同,但在组织细胞中出现的机制和存在部位不同,其颜色为金黄*色,小菱形或针状结晶,或为无定形颗粒,可溶于碱性溶液中,它不含铁,Perls反应阴性。血红蛋白在无氧条件下可分解形成橙色血质,因此可常见于梗死组织,大出血灶或血肿的中心部,通常见于细胞外,但有时也可被巨噬细胞吞噬于细胞内。

④胆红素或者说胆色素,是由于它是组成胆汁的色素而得名,切片上见到的胆红素为淡黄*色至淡褐色。折光性小的色素颗粒或团块。它的来源是血循环里衰老的红细胞,由网状内皮系统破坏后释放出的血红蛋白,经过一系列的分解过程,先形成间接胆红素,又称非结合胆红素,它在肝细胞内与葡萄糖醛酸结合,转化为水溶性的结合胆红素。由于胆红素在用VanGieson法显示时呈绿色,因而可用该法来显示胆红素。

⑤疟色素,是由疟原虫侵入红细胞后,将血红蛋白改变为一种黑褐色的颗粒,沉积于成熟的疟原虫死体内,当疟原虫死后,红细胞被破坏,色素被体内的网状内皮细胞所吞噬,故常见于肝、脾等器官的网状内皮细胞。

⑥血吸虫色素,它是由血吸虫吸食红细胞后消化血红蛋白时所形成的黄褐色色素,在化学结构上与疟色素相同,这两种色素含铁,但无活性,因而铁反应呈阴性。

血红蛋白是体内有色的亚铁血红素和无色素的珠蛋白二者的化合物,当血红蛋白破坏后,血红蛋白可分解成各种血源性色素。
血红蛋白→珠蛋白+亚铁血红素=疟色素,血吸虫色素(水解后)=含铁血黄素+橙色血质

2、非血源性色素(包括黑色素,假黑色素,脂褐素,血褐素,蜡样色素,嗜铬色素,肠嗜铬细胞,亲银颗粒,嗜银细胞颗粒)

①黑色素,镜下该色素常为淡黄棕色至深褐色的颗粒,大小不等,形状不一,均匀地散布于胞质内或胞质的边缘,皮肤中的黑色素是由一种被称为黑色素母细胞所产生,它来源于神经嵴,在胚胎发育过程中,由神经嵴移行到皮肤等处。这种细胞含有合成黑色素所必需的酪氨酸氧化成黑色素,人体中的黑色素,主要存在于皮肤的基底细胞。毛发的毛球。眼球的虹膜和睫状体,中脑的黑质,偶见于淋巴结。在病理情况下,良性肿瘤的可见于痣,恶性肿瘤的可见于恶性黑色素瘤。显示黑色素的方法有Masson-Fontana.该法的染色原理主要是根黑色素具有还原硝酸银的能力,把黑色素还原为于镜下可见的黑色金属银。另外,应用免疫组织化学的方法,也可将黑色素给予显示出来,如S—100,HMb45。

②假黑色素,它是出现于大肠粘膜的一种类似黑色素的棕 黄*色色素,但并非真正的黑色素,故称为假黑色素。它可能是由于肠内蛋白质腐化后,经过粘膜中某处与酷氨酸相似酶的作用而形成的色素。

③脂褐素,又称棕 色萎缩性色素或消耗性色素。大约会50%为脂类物质,其余为蛋白质和其它物质。它主要见于老年或患慢性消耗性疾病的患者。如老年人的心肌细胞,肝细胞,肾上腺皮质的网状带和神经节细胞内,主要位于细胞的两端(心肌)或者在细胞核的周围。它的出现可能是由于细胞中的自噬溶酶体(胞溶液体)内的细胞器具碎片发生某种物理化学变化,不能被酶 消化而形成的一种不溶性的残留小体,也可以说脂褐素变是类脂的氧化产物。早期脂褐素能被苏丹染色,晚期由于具有还原能力,可用Schmord法或者PAS显示。

(二)、外源性色素

这一类是由外界寻入的色素,它们主要是被肺部的吞噬细胞所吞噬的尘埃,炭沫,矽,钙铜,锌,铅等等。

(三)、人为色素

这一类色素是人们在工作中无意造成的色素,比如某些含血较多的组织或器官,当用甲醛固定后,由于甲醛含有较多的杂质,导致了福尔马林色素的形成。还有含氯化汞盐沉着,苏木素染液中的氧化物附着,同时要提倡使用中性缓冲福尔马林固定液,如此可增加对铁离子的检出速度,避免福尔马林色素的形成。

当出现上述色素时有的可以马上鉴定出来,有的则难以鉴别,这主要是由于它们HE染色都呈黄棕色或黑褐色的颗粒,因此必须靠某些特殊的方法给予区别,方能作出正确的判断。

二、黑色素显示法

(一)、硫酸亚铁法

结果:黑色素呈绿至黑绿色,背景呈Van Gieson作色。

注意事项:

1、该法的对比染色也可用核固红来进行,但不能用苏木素染核,否则会影响对阳性物质的判断。

2、所用的浸染液必须新鲜配制,否则不能获得结果。

3、如欲监别或排除含铁血黄素时,还需作铁反应证明。

染液的配制:

1、硫酸亚铁水溶液

硫酸亚铁 2.5g

蒸馏水 凑足100ml过滤后即可使用。

2、铁氰化钾醋酸液

铁氰化钾1g

蒸馏水99ml

冰醋酸1ml

(二)、Masson-Fontana氨银法

结果:黑色素,亲银颗粒,嗜铬颗粒呈黑色,背景呈对比染色。

注意事项:

1、对比染色如用Van Gieon则95%分化,如用核固红,则需水洗10分钟以上。

2、由于该法可用于亲银反应,因此如要区别黑色素及亲银银颗粒时应注意它们之间的区别。

3、浸染切片不可用微波炉处理,因此该法要在暗处进行浸染,而微波炉内工作时有灯光照明,会影响结果,如需要快速浸染需用微波炉处理时,染液瓶外必须用黑纸紧围起来方能进行,处理时间可在5-10min左右。

氨银液的配制:

取10%的硝酸银水溶液10ml,加入28%的氢氧化铵至产生混浊,此时观察溶液,即为深黄棕色继续加入氢氧化铵,使混浊的溶液变为清亮的溶液,然后再加入数滴的10%的硝酸银液,使溶液呈轻微的混浊,加入100ml蒸馏水,过滤后即可使用。


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