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组织化学技术总论

一、定义:把组织学和生物化学结合在一起的一门学科。

定义:在细胞和组织中,以化学或物理试验法,对某些特殊物质、反应基团和酶促活性进行识别,定位和定量。

二、组织化学的特点:

能够测定化学物质在组织中或细胞内的部位如:RNA—胞浆内、DNA—核内。

三、组织化学的要求:

1、组织要新鲜,有的需要特殊的固定。有的则不要求固定。

2、作用要快,定位定性要准确。所沉淀的颗粒要细。如果作用时间长,则酶容易发生扩散。

3、产生的反应物必须有一定的颜色,这颜色越新鲜越好,如碱性磷酸酶—棕黑色。

4、最后所显示的颜色要有稳定性。

5、所用的试剂纯度要高,尽可能使用保证试剂或分析纯。

6、试剂的分类:

(1)GR(guarantee reagent)保证试剂

(2)AR(analytical reagent)分析试剂

(3)CR(chemical pure)化学纯

(4)LR(laboratory reagent)实验试剂

7、使用器皿要清洁,以免发生人为的沉淀而混淆了阳性。

8、各种试剂的量要准确,不能随意加大任何一种试剂的量。

四、组织化学的方法

1、组织化学的呈色反应

利用细胞内某些物质的物理化学特性,与一种试剂或染料发生反应,产生有色的沉淀,在细胞的所在部位显示出来。

2、免疫组化、免疫荧光法

利用抗原抗体的反应的原理来对各种组织进行定性,对细胞内的物质进行定位。

3、放射自显影术:

利用合适的放射性同位素的粒子,对某些化学物质进行定位测定。

五、一般组织化学的内容

1、色素和无机盐(钙、铁、黑色素、脂褐素,胆色素)

2、脂类(中性脂肪,酸性脂肪,碱性磷酸酯,胆固醇)

3、核酸(DNA、RNA)

4、糖类(单糖、双糖、多糖、粘多糖、粘蛋白、糖脂)

5、蛋白质(显示各种氨基酸或某些功能基)

6、酶(水解酶,碱、酸性磷酸酶、氧化还原酶、各种脱氧脱氢酶)


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