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组织脱水-常规石蜡切片制片

组织经系列酒精的脱水,经透明剂的作用,经熔化的石蜡的浸渍,包埋后所切成的切片称为石蜡切片。它适合于尸体解剖,临床活检和某些科研的切片。

把含于组织内或细胞内的水份用脱水剂把其置换出来的过程称组织脱水。不管是正常的组织,还是有病变的组织,都含有不同程度量的水分。据测定,人体的物质组成约含水55~67%,蛋白质15~18%,脂类10~15%,无机盐3~4%及糖类1~2%。如果不把这些水分脱去,石蜡切片将无法进行,因为石蜡和水不能混合在一起,所以除去组织中的水分成为制片中的关键,用什么物质才能担当起这个重任呢,至今为止,国内所用的都是酒精。因它不管在什么样比例的情况下都能和水混合,所以它可以慢慢地将水从组织中置换出来。酒精脱水力强,对组织又有硬化和易脆的不良影响。在使用时,通常是从低浓度至高浓度,浓度系列通常是70%、80%、90%、95%和100%,组织经过这一系列处理后,基本可达到脱水的目的。临床上如使用含酒精的固定液固定组织时,(Carnoy氏、AAF液)组织不需要经过低浓度的酒精,可直接进入95%酒精脱水
组织脱水,目前常用的有两种方法

一、人工组织脱水法

组织脱水

该法经济实惠,灵活度高,可根据不同的组织及其大小来确定脱水时间,也可根据不同组织及大小分批进行脱水,其优点是:

1.可根据不同的组织及大小,任意增减脱水时间,达到脱水目的。

2.可随时观察组织的变化,随时中断组织的脱水,不使组织过度硬脆。

3.可以多层次地进行脱水。

缺点

1.需耗费人力,每个步骤的递增都需要人工完成。

2.不能大批量的进行脱水。

3.必须在班上完成脱水或者定点于某一浓度的酒精中过夜,晚上无法进行梯度递增。

二、自动组织脱水机脱水法

自动组织脱水机的机型品种繁多,大小不一,国内生产的轨道式和圆盘式两种,国外生产的有圆盘式和柜式两种,上述国内外四种型号的机子,我们都使用过,根据使用的效果做一简单介绍。

1.轨道式自动组织脱水机。这种机子容量小,脱水用的试剂不足一升毫升,组织块脱水用的提篮小,每次只能容纳40块组织左右,它适合于较小的单位,但不适合于大单位。另外,该机在运转时,装试剂的盖子打开,试剂容易挥发,污染环境,对人身体健康不利。

2.圆盘式自动组织脱水机。国内生产的这种机器容量也不够大,每天处理组织块,40块左右,如果大的病理科每天需要处理150块左右组织块时,需要这种机器4台左右。这种机器脱水时也属于揭盖式的,因此,试剂容易挥发,特别在夏天,必须经常添加试剂,以补充被挥发去的试剂。这种机器,对环境同上述机器一样。国外生产的也有同类产品。

3.全密闭柜式电脑控制自动组织脱水机

自动脱水机处理

这种脱水机由电脑、反应缸和试剂贮存缸三个部分组成,这三部分可以分开使用,也可以结合在一起,形成一个柜式,一台电脑可控制5台脱水机。电脑功能包括时间、温度和真空负压等,可在小荧屏上显示出来,同时可显示正在进行的脱水程序。根据需要,该机可编九套程序输入电脑,我们的编程如下:第一套为正常室温下脱水程序,该程序在换新试剂的几天内使用。第二套程序组织块脱水不充分时启动使用,当第三套程序的组织块脱水不好时,则应更换新液;第四套为周末程序,该套程序根据两天的休假时间,安排好组织块的脱水时间。第五套为“八一”程序,第六套为“十一”程序,第七套为元旦程序,第八套为春节程序,这后面几套为节假日程序,根据节假日的放假时间不同,编排不同的程序。反应缸内在15秒左右的时间里抽入反应所需的试剂,当按程序表的时间反应完毕后,在15秒左右的时间,将其送回贮存缸,然后则另换其它试剂,如此反复,直至整个程序完毕。试剂贮存箱内由12个缸组成,每个缸的容量为2.25升。其中用于装固定液的缸1个,装酒精脱水剂的缸7个,装透明剂的缸为2个,另有2个缸,一个装二甲苯,当石蜡在反应缸中完成或浸蜡后,被送回蜡缸(在反应缸的右边)后,用以清除遗存的石蜡,还有一个缸装无水酒精,用以清除遗存的石蜡,还有一个缸装有无水酒精,用以清除二甲苯的残存液。

根据我们对各种不同的脱水机的应用比较,认为这种脱水机有以下特点:

1.该机容量大,每次可处理组织块250-300块,这对于大、中等医院的病理科较合适。

2.全部密闭,所有的试剂都由管道输送。这样一是保证了试剂不挥发,尤其是夏天,室温较高,试剂挥发快,如为揭盖式的脱水机,试剂挥发的程度无法形容,几乎每天都必须添加,这样试剂用量大,二是对环境污染不明显,保证了舒适的工作环境。

带有定期的搅动装置,如此可使组织固定均匀,脱水彻底。

整个过程过置于真空负压的条件下来进行,尤其是浸蜡,可节省1/3以上的时间,浸蜡充分彻底,尤其是对多孔的组织如肺组织,效果更明显。

脱水机脱水的优点有

1.组织脱水均匀;

2.能在无人在的情况下完成组织的梯度递增,完成脱水,透明和浸蜡程序,如此可节省人力物力。

3.能大批量地处理标本。

脱水机脱水存在的不足

1.由于机子的的原因,在脱水时,大小组织一窝煮,造成小组织过度处理而产生硬脆的现象,使之难以切成佳片。

2.如为揭盖式的脱水机,液体容易挥发,污染环境,影响工作条件。


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